去评论
爱生活

pcr目标条带小于100和二聚体怎么区分,引物二聚体和条带怎么区分

123
2022/06/14 04:45:01

pcr目标条带小于100和二聚体怎么区分


这个不好说:一般引物二聚体小于150BP.条带模糊、条带宽、跑的比较快在溴酚蓝前面.你可以跑胶过程总观察一下。如果不是可能为非特异性扩增。您片段要是比较短建议您克隆后测序效果比较好.


PCR的引物二聚体怎么判断
PCR产物电泳,在100到250BP之间有一条亮的带。。。这是不是引物二聚体。两条引物是19和20BP



这个不好说:一般引物二聚体小于150BP.条带模糊、条带宽、跑的比较快在溴酚蓝前面.你可以跑胶过程总观察一下。如果不是可能为非特异性扩增。您片段要是比较短建议您克隆后测序效果比较好.


判断是pcr产物还是引物二聚体


加一个marker,比较一下长度。或者做一个对照,只加引物不加模板,若电泳有条带,就是引物二聚体,建议重新设计引物。


pcr有两条带的问题


能否详细描述一下两条带的位置,另外你以什么作为template?cdna?
因为一般情况下引物二聚体的条带都是或多或少的存在的。
如果是目的条带有两条,那么可能是引物出现了错配,也有可能是本身就有两种可能。回收测序即可。