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怎样做低分子量蛋白的wb
分子量较大的蛋白做wb实验和其他蛋白并没有什么特别的不同
主要注意几个地方
合适的内参印染,一般用的比较多的几种内参分子量都比较小(30~50KD)
合适的凝胶,胶浓度要配制的稀一些,一般选择3%~10%的凝胶
增加转膜时间,分子量较大的蛋白要完全转到膜上需要更长的时间
wb三明治夹心顺序
正确问法应该是:wb实验夹心顺序。具体顺序如下:1.配胶;2.制胶;3.跑胶;4.转移较(转膜);5.封闭和孵抗体;6.扫膜。
wb实验的基本原理:一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质(或酶)。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志,检测蛋白质的方法很多,除ELISA法外,也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。
前两法有“南”和“北”之意,故本法遂被延伸称为Western(西)印迹法,该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。
wb实验难吗
做WB得慢慢来不能着急,实验中任何因素都可能影响结果,所以说WB不仅是技术更是一门艺术
做好WB,我们该怎么做
(脁tiao:古书上指农历月底月亮在西方出现)
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