蛋白质的检验方法，蛋白怎么检测

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蛋白质的检验方法


蛋白质测定方法:
测定蛋白质的方法可分为两大类：
一类是利用蛋白质的共性，即含氮量
、肽键和折射率测定蛋白质含量
；
另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸性和碱性基团
以及芳香基团等测定蛋白质含量。
(1)
凯氏定氮法:
是通过测出样品中的总含氮量再乘以相应的蛋白质系数而求出蛋白质的含量，由于样品中含有少量非蛋白质含氮化合物，故此法的结果称为粗蛋白质含量。(是食品上蛋白质含量测定最常用的方法)
(2)
双缩脲法
(3)
染料结合法
(4)
酚试剂法：方法简便快速，故多用于生产单位质量控制分析。
(5)
紫外分光光度法-近红外光谱法


蛋白质测定怎么测试？


　　目前食品中蛋白子含量的测定通常采用凯氏定氮法。
　　凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下，用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐，然后在碱性条件下将铵盐转化为氨，随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收，再以标准碱滴定，就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定，可由其氮量计算蛋白质含量，故此法是经典的蛋白质定量方法。

　　凯氏定氮法检测的是粗蛋白，原理是检测其中的氮含量，因为氮含量在真蛋白中大约 是16%左右，倒数就是6.25，所以，检测出氮含量后，乘以6.25就是粗蛋白含量了。
　　凯氏定氮法的缺点是把非蛋白中的氮也算进去了，所以，才会有前几年出现的三聚氰胺的事件，三聚氰胺是非蛋白氮，用凯氏定氮法检测时，也把它算进去了，这就是奶粉造假的依据。
　　想了解更多关于凯氏定氮法的详细信息可参阅：百度百科-凯氏定氮法。也可追问我哦~



蛋白质检验实验步骤
蛋白质检验实验步骤，要具体，清楚的，只要蛋白质



选择高蛋白的食物浆液，比如豆浆和蛋清。然后准备检测蛋白质的双缩脲试剂，由A液和B液组成，A液：氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液。B液：硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
在实验时，需要现在待测液体中先在加入A液，先制造出碱性环境，满足B液与蛋白质反应的条件，这样才可以方便进行蛋白质的检测。一段时间后，如果试管中的液体变为紫色，说明待测液体中含有蛋白质，而且颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

扩展资料：
蛋白质检验注意事项：
用户需要注意样品应是均匀的，若是固体样品应事先研细过筛，液体样要混合均匀。
样品放入凯氏烧瓶时，不要黏附瓶颈上，万一黏附可用少量水缓慢冲下，以免被检样消化不完全，使结果偏低。
如果称1g以上的样品，就需要K氏烧瓶最小500ml，800~1000ml的更好，这样的K氏烧瓶对于缩短氨化时间，加热的均匀性和完全氨化效果最好。
参考资料来源：



蛋白质含量的测定方法有哪些



蛋白质含量测定的方法有微量凯氏定氮法、双缩脲法、folin―酚试剂法、考马斯亮兰法、紫外吸收法等。
1、微量凯氏定氮法：含氮有机物即分解产生氨（消化），氨又与硫酸作用，变成硫酸铵。经强碱碱化使之分解放出氨，借蒸汽将氨蒸至酸液中，根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。
2、双缩脲法：双缩脲是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。
3、folin―酚试剂法：这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法，由于其试剂乙的配制较为困难，近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。
4、考马斯亮兰法：1976年由bradford建立的考马斯亮兰法，是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这一方法是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。
5、紫外吸收法：蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度（即光密度值）与蛋白质含量成正比。